質(zhì)粒小量提取試劑盒II型，Plasmid Mini Kit II(50)詳細(xì)介紹
美國(guó)Omega包含了多款系列的提取試劑盒及實(shí)驗(yàn)耗材，溶液等，包含：快速過(guò)濾超大量質(zhì)粒提取試劑盒，質(zhì)粒小量提取試劑盒I型，質(zhì)粒大量提取試劑盒，質(zhì)?？焖僦辛刻崛≡噭┖校|(zhì)?？焖俅罅刻崛≡噭┖?，酵母質(zhì)粒提取試劑盒，96孔板快速過(guò)濾質(zhì)粒提取試劑盒，其他系列等，作為Omega代理商，上海遠(yuǎn)慕生物秉承信譽(yù)為生存之本的宗旨，對(duì)于產(chǎn)品的質(zhì)量上是層層把關(guān)，價(jià)格上也非常實(shí)惠，訂購(gòu)！
名稱：質(zhì)粒小量提取試劑盒II型
品牌：Omega
供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕
系列：質(zhì)粒小量提取試劑盒
貨號(hào)：D6945-01
型號(hào)：Plasmid Mini Kit II(50)
用途：從小于15ml培養(yǎng)過(guò)夜的菌液提取50-70ug高純度質(zhì)粒DNA
質(zhì)粒小量提取試劑盒II型使用范圍與技術(shù)指標(biāo)：
1.適用于從菌液中提取各類高、中、低拷貝量的質(zhì)粒。
2.本試劑盒可純化長(zhǎng)度達(dá)15kb的質(zhì)粒。
3.過(guò)夜培養(yǎng)的菌液（一般OD600>1.5），高拷貝量質(zhì)粒提取能力每毫升菌液可達(dá)4-6μg，如pUC18等；中低拷貝量質(zhì)粒每毫升菌液1-3μg，如pET系列載體。
質(zhì)粒小量提取試劑盒采用經(jīng)典的堿裂解法和硅膠柱純化方式，適合于從1.5-5.0ml培養(yǎng)過(guò)夜的大腸桿菌(DH5α, JM109)等菌液中抽提5-35µg高純度的質(zhì)粒DNA。操作者可在30分鐘內(nèi)完成多個(gè)樣品的質(zhì)粒提取工作。純化的質(zhì)粒可以直接用于自動(dòng)測(cè)序、限制性內(nèi)切酶酶切、PCR、標(biāo)記等實(shí)驗(yàn)。從1.5-5.0ml培養(yǎng)過(guò)夜的菌液中收集細(xì)菌后，采用經(jīng)典的堿裂解法裂解細(xì)菌，離心去除染色體DNA和蛋白質(zhì)，上清液轉(zhuǎn)移至硅膠柱，離心吸附質(zhì)粒DNA，經(jīng)兩種溶液洗滌去除殘余蛋白質(zhì)和各種雜質(zhì)，zui后用Elution Buffer洗脫出質(zhì)粒DNA。
Plasmid Mini Kit II(50)，質(zhì)粒小量提取試劑盒II型使用流程：
*次使用時(shí)，將試劑盒攜帶的RNaseA全部加入到溶液SI中，混合均勻，4°C保存。
1.取2ml菌液，8,000rpm離心1min，去除上清，收集菌體，倒盡或吸干培養(yǎng)基。（菌液較多時(shí)可以通過(guò)多次離心將菌體沉淀收集到一個(gè)離心管中，一般可多至6-10ml菌液）。
2.向留有菌體沉淀的離心管中加入150μl溶液SI(請(qǐng)先檢查是否已加入RNaseA），吸打或振蕩至*懸浮菌體。（如果菌塊未*混勻，會(huì)影響質(zhì)粒的得率和質(zhì)量）。
3.向離心管中加入250μl溶液SⅡ，溫和地顛倒離心管6-8次使菌體讓其裂解。（混勻一定要溫和，與之前步驟相比，此時(shí)菌液應(yīng)變得清亮粘稠，作用時(shí)間不要超過(guò)5min）。
4.向離心管中加入400μl溶液SⅢ，立即顛倒離心管6-8次，充分混勻，此時(shí)會(huì)出現(xiàn)白色沉淀。
5.12,000rpm離心5-10min。（如果上清中還有微小白色沉淀，可再次離心后取上清）小心地將上清移入吸附柱中，室溫放置2分鐘，8,000rpm離心1min，倒掉收集管中的液體，將吸附柱放入同一個(gè)收集管中。（過(guò)柱后液體可進(jìn)行第2次過(guò)柱，增加回收效率）。
6.向吸附柱中加入700μl洗滌液WB(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇)，8,000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
7.向吸附柱中加入500μl洗滌液WB，8,000rpm離心1min，棄廢液。
8.12,000rpm離心2min，將吸附柱敞口置于室溫2-3分鐘，目的是去除吸附柱中殘余的洗滌液WB。
9.將吸附柱放入一個(gè)干凈的1.5ml收集管中，向吸附膜中央加入100-150μl EB(將EB預(yù)熱至60℃可以進(jìn)一步提高得率），室溫放置2min，12,000rpm離心1min。(為了增加質(zhì)粒的回收效率，可將收集液 EB分兩次洗脫，每次50μl加入吸附柱中，效率明顯有提升)。
質(zhì)粒小量提取試劑盒部分相關(guān)產(chǎn)品如下：
96孔板Swift質(zhì)粒提取試劑盒
質(zhì)粒高純（高性能）小量提取試劑盒
質(zhì)粒高純高性能中/大量提取試劑盒
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標(biāo)簽：Plasmid Mini Kit II(50) 質(zhì)粒小量提取試劑盒II型 質(zhì)粒小量提取試劑盒
質(zhì)粒提取試劑盒
